支原体肺炎

Mycoplasma Pneumonia

支原体肺炎

        支原体(Mycoplasma)作为柔膜体纲内缺乏细胞壁的最小原核微生物,以其多态性、滤过性及自主增殖能力为特征,广泛定植于人类与动物的呼吸道及泌尿生殖道;其中肺炎支原体(Mycoplasma Pneumonia)引发呼吸道感染,是间质性肺炎和支气管炎的常见致病病原体;而人型支原体、生殖器支原体与溶脲脲原体主要导致泌尿生殖系统疾病(如非淋菌性尿道炎、盆腔炎),并与围产期并发症(早产、绒毛膜羊膜炎等)显著相关。

        肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae,MP)也称原发性非典型性肺炎,多发于青少年和儿童,占肺炎发生率的15%~30%。主要通过飞沫传播,初期引发上呼吸道感染,引起全身发热,继而下行导致气管炎、支气管炎、毛细支气管炎及肺炎临床表现。感染后症状严重程度呈异质性,以头痛、咳嗽、发热及咽痛为主要特征。影像学检查可见肺部典型浸润性病变,部分病例伴发支气管肺炎。少数患者可进展为肺外器官受累,表现为皮疹、心血管异常及神经系统症状等并发症。肺炎支原体的致病机理核心在于其通过黏附蛋白定植于呼吸道后,一方面藉由产生CARDS毒素和活性氧物质直接损伤上皮细胞,另一方面其膜脂蛋白作为PAMPs激活TLRs/NF-κB通路,诱发大量炎症因子释放和以T细胞过度活化为主的适应性免疫应答,最终导致以免疫病理损伤为主导的肺组织炎症。

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         在构建肺炎支原体引发的肺炎动物模型中,不同物种对肺炎支原体(MP)的敏感性差异较大,以小鼠、大鼠等为主,新西兰兔也能作为较好的免疫治疗动物模型。

        采用低周龄小鼠或低月龄兔的作为实验动物,将活化后的肺炎支原体接种于SP-4液体培养基(含10%灭活胎牛血清、葡萄糖、精氨酸、青霉素抑制剂),在37℃、5% CO₂条件下培养7~12天,观察培养基颜色变化(酚红指示剂由红变黄提示代谢活性)。确定支原体浓度后,动物经异氟烷轻度麻醉后,采用鼻内滴注感染(兔的上呼吸道较长,采用气管插管的方式)的方式来构建肺炎支原体肺炎动物模型,模拟呼吸道自然吸入感染。根据实验目的选择采用线感染后治疗,或者先多次接种疫苗后感染攻毒的方式。

        特别说明:感染后的实验动物必须在ABSL-2动物病原微生物实验室中饲养,肺炎支原体必须在BSL-2生物安全实验室中培养扩增。

 

 

动物模型

1.  肺部病变、体重和状态等临床指标;

2.  肺部肺炎支原体清除率;

3.  病理分析;

4.  炎症因子等;

5.  如果是免疫治疗,测定抗体表水平和血清抗体中和水平等。

评价指标

图1. 肺炎支原体典型菌落形态

图2. 兔肺部外观(感染后病变)

图3. 兔气管插管感染