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联合药敏试验

         联合药敏试验（Combination Antimicrobial Susceptibility Testing）主要用于评估两种或多种抗菌药物联合使用以对抗特定细菌菌株时，是否产生协同（Synergy）、相加（Additive）、无关（Indifferent）或拮抗（Antagonism）作用 。协同作用通过计算分数抑制浓度指数（Fractional Inhibitory Concentration Index, FICI）来量化。其中棋盘法（Checkerboard Method）是其中最常用和标准化的技术。棋盘法通过在微孔板（通常是96孔板）中创建两种抗菌药物的二维浓度矩阵，系统性地测试所有可能的浓度组合对细菌生长的抑制效果，从而定量评估药物间的相互作用。

        双药组合为例：在96孔板中，将药物A沿行（横轴）进行一系列两倍稀释（如从2×MIC～1/32×MIC），将药物B沿列（纵轴）进行一系列两倍稀释。 每个孔中的最终药物浓度是药物A和药物B在该行和该列浓度的组合。通常设置不含药物的生长对照孔（仅培养基+菌液）和不生长对照孔（仅培养基）。

        计算公式：

        FIC Index = (MIC of drug A in combination / MIC of drug A alone) + (MIC of drug B in combination / MIC of drug B alone)

        结果判读（通常采用）：

        1. 协同作用（Synergy）：FIC Index ≤ 0.5；

        2. 相加或无关作用（Additive/Indifferent）：0.5 < FIC Index ≤ 4；

        3. 拮抗作用（Antagonism）：FIC Index > 4。

        案例：在Drug A和Drug B的联合药敏试验中，单独使用Drug A的MIC值为512μg/mL（其他试验测试结果，此处未体现），单独使用Drug B的MIC值为512μg/mL，Drug A联合Drug B药敏试验中，从左上到右下的斜对角线对应联合用药下不同组合的MIC值。如某一联合用药的FIC index计算：联合用药中MIC_(Drug A in combination)=16μg/mL；MIC_(Drug B in combination)=16μg/mL；FIC index=16/512+16/512=0.0625，具有协同作用（Synergy）。

图1. 联合药敏试验结果（酶标仪读数）

图2. 联合药敏试验结果（棋盘法）

[1] Si Z,Lim HW,Tay MYF, et al. A Glycosylated Cationic Block Poly(β-peptide) Reverses Intrinsic Antibiotic Resistance in All ESKAPE Gram-Negative Bacteria. Angew Chem Int Ed Engl. 2020;59 (17):6819-6826.（团队核心技术人员发表文献）

参考文献